(二)植物組織培養(yǎng)方案設(shè)計的基本程序
植物離體培養(yǎng)方案的設(shè)計一般包括以下工作環(huán)節(jié)。研究課題的選擇是整個試驗工作的第一步正確選擇課題,試驗研究就有了良好的開端。一般來說.試驗課題通常來自兩個方面:一是由教師申報承擔(dān)的國家或企業(yè)指定的以此為基礎(chǔ)提:最終的目,]方向;二是學(xué)生自己選定的試驗課題。學(xué)生自選課題時,首先自選課題時首先應(yīng)該明確試驗的目的、需解決的問題及在科研和生產(chǎn)中的作用、效果等。
目標(biāo)植物的確定是由植物組織培養(yǎng)試驗的目的來決定的。如果只是為了訓(xùn)練和培養(yǎng);如果只是少了訓(xùn)練和培養(yǎng)初學(xué)者的植物組織培養(yǎng)技能、植物離體培養(yǎng)過程中生長發(fā)育的一般狀況而設(shè)計的驗證性試驗,就應(yīng)該選擇那些植物組織培養(yǎng)技術(shù)較為成熟的容易獲得成功的植物種類作為試驗對象,以確保試驗教學(xué)目的能順利實現(xiàn);如果是為了培養(yǎng)或提高學(xué)習(xí)者的科研能力或是為了滿足社會生產(chǎn)發(fā)展需要進(jìn)行新技術(shù)開發(fā)而設(shè)計的探究性試驗,就應(yīng)該選擇那些植物組織培養(yǎng)技術(shù)尚不成熟或前人還未進(jìn)行過植物組織培養(yǎng)嘗試的新、優(yōu)、特植物物種或品種作為試驗對象,以確保新植物組織培養(yǎng)技術(shù)研發(fā)成功后能為社會帶一定的經(jīng)濟效益和生態(tài)效益。
2.查詢和收集文獻(xiàn)
培養(yǎng)目標(biāo)確定后,為了進(jìn)一步了解目標(biāo)植物離體培養(yǎng)方面的研究進(jìn)展,增強感性認(rèn)識,以便試驗設(shè)計更具針對性和科學(xué)性,就必須收集足夠數(shù)量的有關(guān)該植物的組織培養(yǎng)研究文獻(xiàn)作參考。參考文獻(xiàn)獲得的途徑如下:到圖書館借閱植物組織培養(yǎng)技術(shù)方面的專著、教材、專業(yè)期刊等紙質(zhì)文獻(xiàn);利用因特網(wǎng)查閱某些專業(yè)網(wǎng)站(如中國植物組織培養(yǎng)網(wǎng)等)、數(shù)據(jù)厙(如中國知網(wǎng)的《中國學(xué)術(shù)期刊網(wǎng)絡(luò)出版總庫》、《中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》,維普資訊網(wǎng)的《中文科技期刊數(shù)據(jù)庫》等)、私人博客中的有關(guān)電子文獻(xiàn);到相關(guān)科研所、高等院校、植物組織培養(yǎng)工廠等企事業(yè)單位參觀和咨詢訪問。
當(dāng)培養(yǎng)對象是國內(nèi)外首次進(jìn)行離體培養(yǎng)研究的植物,無文獻(xiàn)可查時,可以根據(jù)植物分類學(xué)知識,收集那些與其親緣關(guān)系較近的品種或物種的梢物組織培養(yǎng)研究文獻(xiàn)。
3、分析研究文獻(xiàn)
植物離體培養(yǎng)經(jīng)常受很多未知因素或變量困擾,一次試驗獲得的結(jié)果有時很難在下一次試驗中重復(fù),或者一個實驗室取得的研究成果難以在另一個實驗室重新實現(xiàn),且實驗搴中研究成功的方法需要加以調(diào)整才能在規(guī);a(chǎn)中產(chǎn)生類似的結(jié)果·因此,在設(shè)計植物組織培養(yǎng)試驗方案時,對他人研究方案切勿照本宣科,一味模仿·正確的做法如下:在教師或植物組織培養(yǎng)專家的指導(dǎo)下,首先要對巳收集到的所有文獻(xiàn)進(jìn)行認(rèn)真別、去偽存真,然后對可信度較高的文獻(xiàn)進(jìn)行認(rèn)真的研讀、分析,獲取必要的植物組織培養(yǎng)技術(shù)信息,以備設(shè)計植物組織培養(yǎng)試驗時參考.分析研讀植物組織培養(yǎng)文獻(xiàn)時,首先要注意收集以下幾方面的技術(shù)信息:.被選擇外植體0型、來源部位、生狀態(tài),發(fā)甯年齡.取材季節(jié)、處理方法!包括預(yù)理和消毒)、剪取大小、接種方式、污染、褐化、分裂、分化及其成苗途徑等內(nèi)容,離體培養(yǎng)各階所選用培養(yǎng)基的基本類型、配方改良劑篩選方法,尤其是培養(yǎng)基中添加植物生長調(diào)節(jié)劑的種類和使用劑量;.外植體培養(yǎng)條件的選擇與調(diào)控情況;@試管苗馴化條件及移栽基。
配制方法。其次對收集到的各種技術(shù)信息進(jìn)行深人分析整理,歸納總結(jié)出影響目標(biāo)植物離體培養(yǎng)各個環(huán)節(jié)的主要因素。
4,方案設(shè)計
植物離體培養(yǎng)的方案設(shè)計一般包括試驗設(shè)計、試驗實施、數(shù)據(jù)分析和驗證試驗四個步驟。試驗設(shè)計是進(jìn)行植物組織培養(yǎng)方案設(shè)計的重要環(huán)節(jié),試驗設(shè)計合理與否不僅直接關(guān)系到能否獲得所需要的數(shù)據(jù)資料,而且還直接影響數(shù)據(jù)資料的質(zhì)量。學(xué)科不同、研究問題的目的和性質(zhì)不同,試驗設(shè)計的方法也不同。植物離體培養(yǎng)的試驗設(shè)計一般采用單因素試驗、多因素試驗和廣譜試驗等方法,但以單因素試驗和多因素試驗最為常見。單因素試驗是指在一項試驗中只有一個試驗因素可設(shè)置為若干不同水平,其他的可控因素不變的試驗多因素試驗則是指在一項試驗中有兩個或兩個以上的試驗因素同時設(shè)置為若干不同水平的試驗。在多因素試驗設(shè)計時,常用的設(shè)計方法有正交試驗設(shè)計和均勻試驗設(shè)計兩種。正交試驗中各個試驗因素搭配均勻,以最大限度排除其他因素的影響,突出被考察因素的作用,試驗結(jié)果能基本體現(xiàn)因子間的交互作用,試驗數(shù)據(jù)處理簡單,能比較容易判斷各因素對試驗對象的影響效應(yīng)。