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黃花風(fēng)鈴木的組培快繁技術(shù)

  黃花風(fēng)鈴木( Tabebuia chrysantha )為紫葳科風(fēng)鈴木屬落葉喬木,原產(chǎn)墨西哥、中美洲、南美洲,現(xiàn)分布在世界熱帶地區(qū),在我國(guó)華南地區(qū)和西南地區(qū)均有引種,引種十幾年來(lái),已被廣泛應(yīng)用于華南地區(qū)園林、庭院綠化,是良好的園林綠化與行道樹(shù)種 。黃花風(fēng)鈴木會(huì)隨四季變換不同的彩衣,具有春華、夏實(shí)、秋綠、冬枯的獨(dú)特風(fēng)韻及呈現(xiàn)出良好的景觀效果,其花期在春季,花先葉開(kāi)放,花冠風(fēng)鈴狀,盛開(kāi)時(shí)滿樹(shù)金黃,頗為壯觀,具有佳的觀賞價(jià)值 。在我國(guó)南方的廣東、海南等省多用作行道樹(shù)、庭院樹(shù)以及園林樹(shù)種。木材可用于制造家具和樂(lè)器,樹(shù)皮具有重要的藥用價(jià)值;黃花風(fēng)鈴木生長(zhǎng)速度中等,耐熱、耐旱、耐瘠、抗污染、萌芽力強(qiáng)、易移植,不僅可以美化環(huán)境,而且具有良好的經(jīng)濟(jì)效益,是值得推廣和應(yīng)用的良好景觀樹(shù)種 。
  
  黃花風(fēng)鈴木的常規(guī)繁殖方式為播種育苗,但其種子壽命短,很容易喪失活力,需要即采即播,其種子成熟期在 4~5 月 。因此,用種子繁殖受季節(jié)性限制,難以滿足市場(chǎng)的需求。而通過(guò)組織培養(yǎng)的方式進(jìn)行苗木繁殖,其繁殖速度快,苗木質(zhì)量好,可達(dá)到苗木規(guī);a(chǎn)的目的。目前,國(guó)內(nèi)利用組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖黃花風(fēng)鈴木的有關(guān)研究少,公開(kāi)的只有 2 項(xiàng)相關(guān)的發(fā)明專(zhuān)利,或其中 1 項(xiàng)(“一種黃花風(fēng)鈴木組織培養(yǎng)快速繁殖方法”CN201710170198.1)也是筆者所擁有的所有權(quán)專(zhuān)利 。筆者根據(jù)試驗(yàn)研究總結(jié)了黃花風(fēng)鈴木的組培快繁技術(shù),旨在提供一種實(shí)用、有效的育苗途徑,為實(shí)現(xiàn)黃花風(fēng)鈴木的快速繁殖提供理論依據(jù)。
  
  1 無(wú)菌苗的獲取
  
  1.1 外植體的選取及處理
  
  選擇黃花風(fēng)鈴木的種子作為外植體。由于黃花風(fēng)鈴木的果實(shí)成熟后會(huì)自然裂開(kāi),種子易隨風(fēng)飄散,所以應(yīng)在果實(shí)成熟而未開(kāi)裂前,即由綠轉(zhuǎn)變成黃褐色時(shí),及時(shí)采收,采收后曬干果實(shí),等果莢自然開(kāi)裂后抖出種子,并陰干 。剝?nèi)ネ鈱臃N殼,取種仁,在超凈工作臺(tái)上以 0.1% HgCl 2 溶液消毒 8~10min,再用無(wú)菌水清洗4~5 次,瀝干水分。
  
  1.2 初始培養(yǎng)
  
  將已消毒處理好的種子接種至初始培養(yǎng)基上,初始培養(yǎng)基為 MS+6-BA 0.4mg/L+NAA 0.2mg/L+ 蔗糖30g/L+ 瓊脂粉 4.2g/L,pH 值 5.8。接種后暗培養(yǎng) 5d,再移至自然光照條件下培養(yǎng) 20d,培養(yǎng)溫度為 25±2℃。暗培養(yǎng) 5d 后種子開(kāi)始萌動(dòng),在自然光照條件下繼續(xù)培養(yǎng) 5d 即可長(zhǎng)出小苗,20d 無(wú)菌小苗可長(zhǎng)至約 4cm 高。
  
  2 不定芽的分化及增殖培養(yǎng)
  
  2.1 不定芽的分化
  
  將初始培養(yǎng)獲得的無(wú)菌苗剪切成長(zhǎng)約 2cm的帶腋芽節(jié)段,接種到芽分化培養(yǎng)基上,芽分化培養(yǎng)基為MS(改良)+6-BA 1.5mg/L+IAA 0.3mg/L+L- 半胱氨酸25mg/L+ 蔗糖 30 g/L+ 瓊脂粉 4.2g/L,pH 值 5.8。接種時(shí)將帶腋芽節(jié)段斜插在培養(yǎng)基上,接種后放在培養(yǎng)室內(nèi)弱光條件下培養(yǎng),光照較弱可促進(jìn)不定芽的分化。培養(yǎng)溫度 25±2℃,光照強(qiáng)度 1000~1500Lx,每天光照12~14h,培養(yǎng) 20d 左右在腋芽處可分化出小芽。此時(shí),將培養(yǎng)材料移到光照強(qiáng)度稍強(qiáng)的地方繼續(xù)培養(yǎng),光照強(qiáng)度 2000~3000Lx,在培養(yǎng)溫度和光照時(shí)間不變的條件下,適當(dāng)提高光照強(qiáng)度可促進(jìn)已分化的小芽長(zhǎng)高。
  
  2.2 不定芽的增殖
  
  待分化出的小芽長(zhǎng)到 2cm 以上時(shí),再將小芽切下,剪成帶腋芽的小段,轉(zhuǎn)接至芽增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行芽的增殖培養(yǎng),每隔 30d 左右轉(zhuǎn)接 1 次。芽增殖培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件與芽分化培養(yǎng)相同,但隨著增殖代數(shù)的增加,需要根據(jù)培養(yǎng)材料的生長(zhǎng)情況適當(dāng)調(diào)整培養(yǎng)基配方或培養(yǎng)條件,以保證繼代苗正常生長(zhǎng),增殖系數(shù)達(dá) 3.0 以上。
  
  3 生根培養(yǎng)及煉苗
  
  3.1 生根培養(yǎng)
  
  剪取生長(zhǎng)健壯,長(zhǎng) 3cm 以上的繼代苗接種至生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng),生根培養(yǎng)基為 1/4MS+IBA1.0mg/L+ 活性炭 0.2g/L+ 蔗糖 20g/L+ 瓊脂粉 4.5g/L,pH 值 5.8,生根培養(yǎng)的無(wú)機(jī)鹽濃度降低為 1/4MS 更有利于黃花風(fēng)鈴木誘導(dǎo)生根。接種后放在培養(yǎng)室內(nèi)暗培養(yǎng),在根原基誘導(dǎo)的第一階段需進(jìn)行一定時(shí)間的暗培養(yǎng),有利于誘導(dǎo)生根 。培養(yǎng) 12d 后小苗的基部切口處開(kāi)始膨大長(zhǎng)出愈傷組織,繼續(xù)培養(yǎng) 5d 后從愈傷組織處長(zhǎng)出白色的根,生根率達(dá) 92%以上。然后移到弱光條件下繼續(xù)培養(yǎng),培養(yǎng)溫度為 25±2℃,光照強(qiáng)度1000~1500Lx,每天光照 12~14h。
  
  3.2 煉苗
  
  生根培養(yǎng) 25d 后,待小苗的根系基本長(zhǎng)齊,將生根瓶苗移至煉苗棚進(jìn)行煉苗,煉苗時(shí)間為 10d。煉苗棚必須采光良好,并配備有遮陽(yáng)網(wǎng),隨時(shí)可以調(diào)節(jié)光照強(qiáng)度。在剛從培養(yǎng)室移到煉苗棚的最初幾天,常需要適當(dāng)遮蔭,以防強(qiáng)光灼傷幼苗,待小苗慢慢適應(yīng)室外的環(huán)境后再加強(qiáng)光照,使組培生根苗木質(zhì)化程度逐漸增強(qiáng),更能適應(yīng)移栽后的生長(zhǎng)環(huán)境。
  
  4 生根苗移栽
  
  4.1 育苗基質(zhì)準(zhǔn)備
  
  育苗基質(zhì)好壞常常是能否移栽成活和幼苗生長(zhǎng)的關(guān)鍵。黃花風(fēng)鈴木對(duì)土壤要求不嚴(yán)格,喜疏松肥沃、排水良好、富含有機(jī)質(zhì)的中性至微酸性壤土 。因此,育苗基質(zhì)選用泥炭︰黃心土︰河沙 =2︰1︰1(體積比),將 3 種基質(zhì)混合均勻,分裝到育苗營(yíng)養(yǎng)袋,然后擺放于育苗托上,再用 0.2%高錳酸鉀溶液對(duì)育苗基質(zhì)進(jìn)行消毒,消毒后用清水將基質(zhì)淋透,置于溫室育苗棚內(nèi)備用。
  
  4.2 生根苗移栽
  
  將經(jīng)過(guò)煉苗的生根苗從培養(yǎng)瓶中取出,用清水輕輕地洗去小苗根系上附著的培養(yǎng)基,注意不要損傷根系和莖葉。移栽時(shí)先用鑷子在育苗營(yíng)養(yǎng)袋的基質(zhì)挖 1個(gè)小穴,然后將洗干凈的生根小苗移栽至小穴內(nèi),再用手輕輕將基質(zhì)壓一下,然后要淋透水,用薄膜覆蓋以保溫保濕。
  
  4.3 移栽后管理
  
  4.3.1 溫濕度控制。在生根苗移栽初期,光照不能過(guò)強(qiáng)或過(guò)弱,可以用遮陽(yáng)網(wǎng)適度遮蔭,還要經(jīng)常噴霧澆水,保持環(huán)境相對(duì)濕度在 85%以上。保持溫室育苗棚溫度在 20~25℃,不宜過(guò)高,因?yàn)楦邷馗邼竦沫h(huán)境易使小苗感病死亡,一般是較低的氣溫有利于緩苗。緩苗后(有初生新葉出現(xiàn))逐步揭開(kāi)薄膜適度通風(fēng),直至完全揭開(kāi)。
  
  4.3.2 病害防治和水肥管理。每周?chē)娛?1 次殺菌劑,殺菌劑一般用甲基托布津、多菌靈、代森錳鋅等抗菌藥,預(yù)防病害的發(fā)生,幾種殺菌劑可以交替使用,避免病菌產(chǎn)生抗藥性。移栽后 30d,隨著小苗的生長(zhǎng),進(jìn)入后期管理,此時(shí)可在陰天時(shí)將苗木移出溫室育苗棚進(jìn)行苗木常規(guī)管理。主要是淋足水,保持 60%~80%的相對(duì)濕度,定期施肥、噴農(nóng)藥。
  
  5 結(jié)語(yǔ)
  
 。1)以黃花風(fēng)鈴木的種子作為外植體比較方便消毒,更容易獲得無(wú)菌材料。消毒前需剝?nèi)ネ鈱臃N殼,由于里面的種仁受外界污染少,因此消毒起來(lái)比較簡(jiǎn)單,外植體污染率低。同時(shí),種子要隨采隨用,避免因儲(chǔ)存過(guò)久影響種子的活力而降低種子的萌芽率。
  
 。2)黃花風(fēng)鈴木不定芽的誘導(dǎo)和分化可以用同一種培養(yǎng)基,適合不定芽誘導(dǎo)和分化的培養(yǎng)基為 MS(改良)+6-BA 1.5mg/L+IAA 0.3mg/L+L- 半胱氨酸 25mg/L+蔗糖 30g/L+ 瓊脂粉 4.2g/L,pH 值 5.8。在增殖培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)材料容易出現(xiàn)褐化現(xiàn)象,在培養(yǎng)基中添加 L-半胱氨酸可以較好地控制材料在培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)的褐化現(xiàn)象,提高不定芽的分化率;同時(shí),隨著增殖代數(shù)的增加,要注意激素的累積對(duì)培養(yǎng)材料生長(zhǎng)的影響,需要根據(jù)培養(yǎng)材料的生產(chǎn)情況隨時(shí)適當(dāng)調(diào)整激素的用量。
  
 。3)黃花風(fēng)鈴木組培苗生根相對(duì)比較困難,經(jīng)過(guò)多次調(diào)試,發(fā)現(xiàn)降低培養(yǎng)基中無(wú)機(jī)鹽濃度和蔗糖用量對(duì)其生根更有利。一般來(lái)說(shuō),生根培養(yǎng)基的鹽離子濃度和糖濃度均低于增殖培養(yǎng)基,降低無(wú)機(jī)鹽濃度可提高大多數(shù)植物的生根能力。適合的生根培養(yǎng)基為1/4MS+IBA 1.0mg/L+ 活性炭 0.2g/L+ 蔗糖 20g/L+ 瓊脂粉 4.5g/L,pH 值 5.8。
  
  (4)生根苗在移栽前需進(jìn)行煉苗,增加小苗的木質(zhì)化程度,對(duì)移栽成活更有利。移栽時(shí)基質(zhì)的選擇也很關(guān)鍵,黃花風(fēng)鈴木喜疏松肥沃、排水良好、富含有機(jī)質(zhì)的中性至微酸性壤土,生根苗移栽在溫室大棚內(nèi)進(jìn)行,溫室大棚內(nèi)的溫度比較高,水分蒸發(fā)量比較大,而泥炭土持水量大和保水性能好為植物生長(zhǎng)提供一個(gè)更適合的環(huán)境,再添加適量黃泥土和河沙,可以提高基質(zhì)中的有機(jī)質(zhì)和增強(qiáng)其透氣性。移栽基質(zhì)選用泥炭︰黃心土︰河沙 =2︰1︰1(體積比)較好,移栽成活率較高。
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