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植物組織培養(yǎng)實驗室構(gòu)成

  一個標(biāo)準(zhǔn)的組織培養(yǎng)實驗室應(yīng)當(dāng)包括:洗滌室、準(zhǔn)備室、接種室、培養(yǎng)室、觀察室(或細(xì)胞學(xué)實驗室)、貯存室、溫室等。在實際中可結(jié)合實驗條件,合并部分實驗室。
  
  1.洗滌室
  
  洗滌室專門負(fù)責(zé)植物材料的初步清洗處理(例如把帶泥土和雜菌多、易污染的部位削掉,以便進(jìn)一步?jīng)_洗消毒)、試管苗出瓶、玻璃器皿等清洗與整理工作,室內(nèi)應(yīng)配備1至幾個水槽或清洗玻璃器皿的機(jī)器,1~2個洗液缸,為防止碰壞玻璃器皿,可鋪墊橡膠,地面要耐濕并能排水,上下水道要暢通,備有塑料筐用于運(yùn)輸培養(yǎng)器皿,備有干燥架用于放置干燥刷凈的培養(yǎng)器及存放干凈玻璃器皿的柜子等,把滅菌鍋、蒸餾水發(fā)生器放在此室內(nèi)。
  
  2.準(zhǔn)備室
  
  主要用于植物細(xì)胞組織培養(yǎng)和試管苗生產(chǎn)所需要的各種器具的干燥和保存,培養(yǎng)基藥品的稱量、溶解、配制、分裝和高壓滅菌、化學(xué)試劑的存放及配制,重蒸水的生產(chǎn)、植物材料的預(yù)處理及培養(yǎng)物的常規(guī)生理生化分析等操作都在準(zhǔn)備室中進(jìn)行。為了配制各種培養(yǎng)基,室內(nèi)必須有一個較大的平面工作臺及存放各種培養(yǎng)基所需化學(xué)試劑的藥品柜,以及放置常用玻璃器皿、試劑和常用的設(shè)備等。準(zhǔn)備室要求面積大、明亮、墻上安裝有換氣扇,墻的內(nèi)壁和工作臺都要采用耐腐蝕的材料。為了避免工作人員進(jìn)出時將雜菌帶入,準(zhǔn)備室中也可安裝紫外燈,隨時可以滅菌。
  
  3.接種室
  
  接種室是進(jìn)行植物材料的分離接種、培養(yǎng)物的轉(zhuǎn)移、試管苗的繼代等的一個重要操作實驗室,無菌條件的好壞、持續(xù)時間的長短對降低培養(yǎng)物的污染。提高效率關(guān)系很大。接種室除了出入口外,其余應(yīng)全部密閉,一般不安裝風(fēng)扇,保證沒有空氣對流,通風(fēng)換氣需借助空氣調(diào)節(jié)裝置進(jìn)行。接種室的面積要看工作量的大小、接種人員的多少及接種設(shè)備的情況而定,在工作方便的前提下,接種室宜小不宜大,一般10~12m2,為便于放置超凈工作臺門需稍大,應(yīng)裝成雙扇滑門,以減少開關(guān)門時的空氣擾動,要求地面、天花板及四壁盡可能密閉光滑,易于清潔和消毒。室內(nèi)干爽安靜,清潔明亮,在適當(dāng)位置安裝1~2盞紫外線燈,用以照射滅菌消毒,最好安裝一臺小型空調(diào),使室溫可控,這樣可使門窗緊閉,減少與外界空氣對流。如果有條件可將接種室外再設(shè)置一個緩沖間,面積3m2為宜,進(jìn)入無菌操作室前在此更衣?lián)Q鞋帽等,以減少進(jìn)出時帶入雜菌,緩沖間最好也安裝一個紫外線滅蔭燈,用以照射滅菌。
  
  4.培養(yǎng)室
  
  為滿足培養(yǎng)材料生長、繁殖所需的溫度、光照、濕度和通風(fēng)等條件,一般培養(yǎng)室要求非常衛(wèi)生、恒溫并有理想的光照控溫系統(tǒng)。培養(yǎng)室的溫度應(yīng)當(dāng)是可控的,為使溫度恒定和均勻,應(yīng)配有帶自動控溫的電暖氣或空調(diào)等設(shè)備,使溫度保持在(25±2)℃,晚上一般不應(yīng)低于20℃。由于熱帶植物和寒帶植物等物種要求不同溫度,最好不同物種有不同的培養(yǎng)室。若要求更高或更低的溫度,可使用裝有熒光燈的培養(yǎng)箱。
  
  培養(yǎng)室應(yīng)建在房屋的南面,除南面有大窗戶外,東邊或兩邊也應(yīng)有大窗戶,以便盡量利用自然光。培養(yǎng)室的大小,可根據(jù)需要培養(yǎng)架的大小、數(shù)目以及其他附屬設(shè)備而定,其設(shè)計以充分利用空間及節(jié)省能源為原則,高度比培養(yǎng)架略南為宜,周圍墻壁要求有絕熱防火的性能,最好裝成滑門,便于保溫,節(jié)省能源。
  
  現(xiàn)代組培文驗窒大多設(shè)計為采用天然太陽散射光作為主要能源。這樣可以節(jié)約能源,而且組培苗接受太陽光生長良好,馴化易成活。培養(yǎng)室的光源通常采用普通的白色日光燈,可在陰天用于補(bǔ)光,但有些情況下也需要較強(qiáng)的光照或完全黑暗。光源設(shè)備上可安裝定時開關(guān)鐘,無須每天要人工開關(guān)燈,一般需要每天光照10~16h。暗培養(yǎng)一般是在生化培養(yǎng)箱里進(jìn)行的。在培養(yǎng)室內(nèi)應(yīng)設(shè)有若干培養(yǎng)架以放置培養(yǎng)物,培養(yǎng)材料放在培養(yǎng)架上培養(yǎng)。培養(yǎng)架大多金屬制成,一般設(shè)5層,最低一層離地高約20cm,其他每層間隔30cm左右,培養(yǎng)架高1.7m左右。培養(yǎng)架長度都需依日光燈的長度而設(shè)定。
  
  培養(yǎng)室的濕度也是一個值得考慮的問題,相對濕度以保持在70%~80%為好?砂惭b自動加濕器或恒溫恒濕機(jī),當(dāng)培養(yǎng)室的相對濕度降到50%以下時,應(yīng)采取措施增加濕度,以免造成試管或培養(yǎng)容器內(nèi)培養(yǎng)基干涸。如果濕度太高,棉塞發(fā)潮,培養(yǎng)物污染的機(jī)會就會增加。
  
  如果要進(jìn)行懸浮培養(yǎng),培養(yǎng)室內(nèi)還應(yīng)設(shè)有搖床,可以是平動式的也可以是旋轉(zhuǎn)式的。必要時也可購置溫光可控式搖床。若有條件,最好設(shè)置一臺備用發(fā)電機(jī),以便在停電時使用。
  
  5.觀察宣或細(xì)胞學(xué)實驗室
  
  如果條件允許,可設(shè)置一間觀察室,放置顯微鏡、解剖鏡或照相設(shè)備,便于對實驗材料進(jìn)行認(rèn)真觀察、分析和照相。
  
  6.貯存室
  
  如果條件允許,最好設(shè)置一間貯存室,把暫時不用的器皿、用具等存放在貯存室內(nèi),也可以用作種質(zhì)保存。這種房間應(yīng)當(dāng)陰涼,室溫較低,能見一點(diǎn)散射光更好。
  
  7.溫室
  
  若條件許可,可建立人工氣候室及試管苗煉苗用的溫室。試管苗移栽必須要有溫室,建造溫室如用鋼架、玻璃成本太高,可用單坡塑料大棚代替,這種大棚在向陽面搭棚,其余三面打墻,以防風(fēng)保溫,成本低廉。溫室的面積依據(jù)科研和生產(chǎn)實際情況而定。為了節(jié)省投資,降低成本,組織培養(yǎng)實驗室建得不要太大。據(jù)報道,國外建立私人或家庭組織培養(yǎng)實驗室,面積36~40m2,每年生產(chǎn)組織培養(yǎng)苗數(shù)10萬株,可供數(shù)個苗圃地育苗需要。
組培室設(shè)備
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