植物組織培養(yǎng)苗的管理
光照對(duì)離體培養(yǎng)物的生長發(fā)育具有重要的作用。通常對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)來說,暗培養(yǎng)比光培養(yǎng)更加合適。但器官分化需要光照,并隨著試管苗的生長,光照強(qiáng)度需要不斷地加強(qiáng),才能使小苗生長健壯,并促進(jìn)它從“異養(yǎng)”向“自養(yǎng)”轉(zhuǎn)化,以提高移植后的成活率。普通培養(yǎng)室要求每日光照12~16h,光照強(qiáng)度為1000~50001x。如果培養(yǎng)材料要求在黑暗條件中生長,可用鋁箔或者適合的黑色材料包裹在容器的周圍或置于暗室中培養(yǎng)。植物組織培養(yǎng)苗對(duì)溫度的調(diào)控要求要比光照顯得更為突出。不同的植物有不同的最適生長溫度,大多數(shù)植物最適溫度在23~32C。培養(yǎng)室一般所用的溫度是(25±2)C,低于15C或高于35C,對(duì)生長都是不利的。而這些條件又不是固定不變的,它是因不同植物、不同外植體或外植體分化的不同階段而不同的。山葵組織培養(yǎng),其植物組織培養(yǎng)苗的培養(yǎng)溫度總保持在18~20C,小苗才分化迅速生長良好,超過20C,小苗就顯得無精打采,到23C小苗葉就開始發(fā)黃。而卡特蘭組織培養(yǎng)苗要在23C以上時(shí)才能很好生長。
一般菊科組織培養(yǎng)苗的培養(yǎng)溫度不宜超過25 C,仙客來組織培養(yǎng)苗培養(yǎng)溫度在20C為合適,溫度再高就不利于生長,蝴蝶蘭則要在25C才能很好生長,溫度高到30C也能生長。所以在植物組織培養(yǎng)苗的培養(yǎng)管理中一定要注意結(jié)合植物的實(shí)際要求控制培養(yǎng)溫度。由于植物組織培養(yǎng)苗是在空間很小的植物組織培養(yǎng)瓶內(nèi)生長的,其瓶內(nèi)溫度受外界影響很大,尤其是光照的影響,實(shí)踐證明植物組織培養(yǎng)瓶在光照的條件下內(nèi)部溫度要比外界溫度高1~3C,如果是太陽光的自然光照,相差就更遠(yuǎn)了,一般要相差3~5C。也就是說如果采用太陽光光照進(jìn)行培養(yǎng),如培養(yǎng)架所處的環(huán)境溫度是25C,則植物組織培養(yǎng)瓶內(nèi)的溫度已達(dá)到30C,要是在這樣的條件下培養(yǎng)仙客來或非洲菊那就很難得到成功。況且自然界太陽光強(qiáng)弱變化無窮,多云時(shí)的光照強(qiáng)度與云層散去太陽光直接照射時(shí)的光照強(qiáng)度要相差3~5倍。清晨、正午、傍晚太陽光的光照強(qiáng)度相差也在3~6倍,甚至更多。
陽光照,哪怕是一個(gè)小時(shí),都有可能的溫度對(duì)指片的格物組織培養(yǎng)苗來說是致命的,很可能在一個(gè)中午就造就保證做到在自然環(huán)境發(fā)生變化時(shí)有相50C,這樣范在先,十瓶植物組織培養(yǎng)苗的死亡。所以必須防應(yīng)的措施跟上,如遮光等。另外植物組織培養(yǎng)瓶往往是一個(gè)個(gè)排列整齊擺放在培養(yǎng)架上,如果培養(yǎng)架四面不能通風(fēng)則在光照的條件下熱能很難散去,瓶內(nèi)溫度也會(huì)居高不下,對(duì)植物組織培養(yǎng)苗生長不利。
濕度對(duì)植物組織培養(yǎng)苗的影響與控制一是培養(yǎng)室的濕度,它的濕度變化隨季植物組織培養(yǎng)中的濕度影響主要有兩個(gè)方面。節(jié)和天氣而有很大變動(dòng),濕度過高或過低都是不利的,過低造成培養(yǎng)基失水而干枯,或滲透壓升高,影響培養(yǎng)物的生長和分化,濕度過高會(huì)造成雜菌滋長,導(dǎo)致大量污染。因此,要求室80%的相對(duì)濕度。濕度過高時(shí)可用除濕機(jī)來降濕,過低時(shí)可通過噴水來增內(nèi)保持70%~80%的相對(duì)濕度。二是培養(yǎng)器內(nèi)的濕度,一般來說植物組織培養(yǎng)瓶內(nèi)的濕度是很高的,它的濕度條件?杀WC100%隨時(shí)間的延長植物組織培養(yǎng)瓶內(nèi)的濕度也在變化,但植物組織培養(yǎng)苗在瓶里如濕度不合適也同樣無法正常生長。而瓶內(nèi)濕度的控制主要由培養(yǎng)基和封口膜來決定的。瓶內(nèi)培養(yǎng)基的多少和配制培養(yǎng)基時(shí)每升培養(yǎng)基內(nèi)瓊脂的多少都與瓶內(nèi)濕度有關(guān)。一般瓶內(nèi)培養(yǎng)基很少,其瓶內(nèi)相對(duì)濕度也會(huì)較低,反之其瓶內(nèi)濕度相對(duì)也就較高。在配制培養(yǎng)基時(shí)瓊脂用量較大,如每升用瓊脂粉7~8g配成的培養(yǎng)基發(fā)硬,則瓶內(nèi)濕度不會(huì)很高。而每升用京脂粉6g左右配成的培養(yǎng)基則發(fā)軟,瓶內(nèi)濕度相對(duì)較高。根據(jù)不同植物對(duì)濕度的不同要求,有時(shí)在配培養(yǎng)基時(shí)調(diào)整瓊脂的用量來滿足所要培養(yǎng)的植物對(duì)濕度的要求。
植物組織培養(yǎng)中,植物組織培養(yǎng)苗的呼吸需要氧氣。在液體培養(yǎng)中,振蕩培養(yǎng)可解決通氣問題。在固體培養(yǎng)中,最好采用通氣性好的瓶蓋或瓶塞。
植物組織培養(yǎng)苗的培養(yǎng)條件的調(diào)控
1.光照的調(diào)控
一是合適的培養(yǎng)室位置,一般選擇在陽面,2~3層樓。光照條件會(huì)好些,可以節(jié)約電源。二是使用電子石英控時(shí)器來自動(dòng)控制人工照明時(shí)間。三是培養(yǎng)架排列要與窗玻璃垂直,便于陽光分布均勻。
2.濕度的調(diào)控
一是培養(yǎng)室天棚、地面、墻壁要有保溫處理。溫度的調(diào)控四是中午陽光比較充足時(shí),靠近窗附近處日照太強(qiáng),要用窗簾遮陽。
三是每個(gè)培養(yǎng)室內(nèi)盡量培養(yǎng)一種或一類植物,便于調(diào)節(jié)到植物生長的最適溫度。二是用空調(diào)或控溫儀來調(diào)控室內(nèi)溫度
3.濕度的調(diào)控
一是調(diào)節(jié)室內(nèi)濕度,通過加濕器來增加濕度,通過除濕機(jī)來降低濕度。二是調(diào)節(jié)培養(yǎng)器內(nèi)濕度,通過增加培養(yǎng)基量,適當(dāng)減少瓊脂用量,使用不透氣的封口膜增加濕度,相反彈 降低濕度。
4.氧氣的調(diào)控
固體培養(yǎng)基主要是通過通氣性好的瓶蓋或瓶塞來增加氧氣,液體培養(yǎng)基是通過振需培養(yǎng)來增加氧氣。