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紅掌組培快繁技術(shù)分析

  紅掌是天南星科花燭屬多年生附生常綠草本花卉,節(jié)間短,株高可達(dá)1m,葉片單生,長(zhǎng)圓狀、心形或卵圓形,深鮮綠色,有光澤。佛焰苞直立張開,蠟質(zhì),卵圓形或圓形,深紅色或橙色。其變種的佛焰苞有不同的顏色,如鑲嵌白綠色、五彩色、乳白色及有精巧紅邊等,極富變化[1]。紅掌的果實(shí)是小漿果,果內(nèi)有種子,粉紅,2~4粒。紅掌的種子成熟需6~7個(gè)月,易失去活力,不易保存,常用的分株繁殖方式難以擴(kuò)大生產(chǎn)。因此,離體快繁成為紅掌產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的理想途徑。紅掌是天南星科植物中較為的觀花觀葉兼宜的觀賞植物,市場(chǎng)開發(fā)前景。前人的研究成果表明,紅掌組織培養(yǎng)中外植體誘導(dǎo)技術(shù)已經(jīng)成熟,但存在再生系統(tǒng)建立緩慢和增殖率不高的問題[2,3]。本試驗(yàn)在前人研究的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步研究紅掌阿拉巴馬叢生芽團(tuán)塊增殖和壯苗培育的問題,以期找出一條縮短紅掌繁育周期的途徑,促進(jìn)紅掌阿拉巴馬的商品化生產(chǎn)。

  

  1、材料與方法

  

  1.1試驗(yàn)材料

  

  以紅掌品種阿拉巴馬的嫩葉為外植體,在清水中沖洗20min,擦干水后,在0.1%HgCl2中消毒15min,用無菌水沖洗3遍后,切割成1cm×1cm大小的葉片塊,接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中,經(jīng)過40d的誘導(dǎo),產(chǎn)生愈傷組織,愈傷組織在增殖過程中產(chǎn)生芽團(tuán)塊,以芽團(tuán)塊為本試驗(yàn)增殖的材料。

  

  1.2試驗(yàn)方法

  

  1.2.1叢生芽增殖。

  

  取阿拉巴馬的叢生芽團(tuán)塊接種于培養(yǎng)基中,其中:6-BA設(shè)3個(gè)濃度梯度,分別為0.5、1.0、1.5mg/L;NAA設(shè)3個(gè)濃度梯度,分別為0.05、0.10、0.20mg/L;KT設(shè)3個(gè)濃度梯度,分別為0.2、0.4、0.8mg/L。共設(shè)6個(gè)處理,分別為MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+KT0.8mg/L(A1)、MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+KT0.4mg/L(A2)、MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+KT0.2mg/L(A3)、MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+KT0.8mg/L(A4)、MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+KT0.4mg/L(A5)、MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+KT0.2mg/L(A6),各培養(yǎng)基中均添加7.6mg/L瓊脂、25mg/L蔗糖。每瓶接種4塊叢生芽團(tuán)塊,大小為0.4cm×0.4cm,每個(gè)處理接種5瓶,共3次重復(fù)。培養(yǎng)條件為溫度25℃,光照強(qiáng)度1600lx,光照時(shí)間10h/d。

  

  1.2.2壯苗培養(yǎng)。

  

  取高約1.5cm的芽,接種在生根壯苗培養(yǎng)基中,6-BA濃度梯度分別為0、0.05、0.10mg/L,NAA濃度梯度分別為0.1、0.3、0.5mg/L,NH4NO3濃度梯度分別為1650、2475、3300mg/L。試驗(yàn)共設(shè)6個(gè)處理,分別為MS+6-BA0mg/L+NAA0.3mg/L+NH4NO33300mg/L(B1)、MS+6-BA0.05g/L+NAA0.5mg/L+NH4NO32475mg/L(B2)、MS+6-BA0.1g/L+NAA0.1mg/L+NH4NO31650mg/L(B3)、MS+6-BA0mg/L+NAA0.3mg/L+NH4NO33300mg/L(B4)、MS+6-BA0.05mg/L+NAA0.5mg/L+NH4NO32475mg/L(B5)、MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L+NH4NO31650mg/L(B6),各培養(yǎng)基中均添加7.6g/L瓊脂、25g/L蔗糖。每瓶接種7個(gè)小芽,每個(gè)處理5瓶,共3次重復(fù)。培養(yǎng)條件為溫度25℃,光照強(qiáng)度1600lx,光照時(shí)間10h/d。

  

  1.2.3組培苗瓶外生根。

  

  選取生長(zhǎng)良好、帶有3張葉片、高3cm的組培幼苗為材料,經(jīng)1周的煉苗后,洗干凈培養(yǎng)基后種植于不同的培養(yǎng)基中,并配合不同的促根處理,45d后統(tǒng)計(jì)苗的生根率及生根數(shù)。共設(shè)16個(gè)處理,分別為育苗泥炭土+IBA0.6mg/L、育苗泥炭土+IBA1.0mg/L、育苗泥炭土+NAA0.6mg/L、育苗泥炭土+NAA1.0mg/L、育苗泥炭土+珍珠巖+IBA0.6mg/L、育苗泥炭土+珍珠巖+IBA1.0mg/L、育苗泥炭土+珍珠巖+NAA0.6mg/L、育苗泥炭土+珍珠巖+NAA1.0mg/L、椰糠+育苗泥炭+IBA0.6mg/L、椰糠+育苗泥炭+IBA1.0mg/L、椰糠+育苗泥炭+NAA0.6mg/L、椰糠+育苗泥炭+NAA1.0mg/L、椰糠+珍珠巖+IBA0.6mg/L、椰糠+珍珠巖+IBA1.0mg/L、椰糠+珍珠巖+NAA0.6mg/L、椰糠+珍珠巖+NAA1.0mg/L。

  

  1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

  

  1.3.1叢生芽增殖。

  

  每周觀察1次,1個(gè)月后統(tǒng)計(jì)叢生芽團(tuán)塊增重,計(jì)算公式如下:

  

  叢生芽增重=接種1個(gè)月后的重量-接種前的重量

  

  1.3.2壯苗培養(yǎng)。

  

  每周觀察1次,1個(gè)月后統(tǒng)計(jì)苗高、新增葉數(shù)、苗重,計(jì)算公式如下:

  

  苗高=接種1個(gè)月后的高度-接種時(shí)的高度;

  

  新增葉數(shù)=接種1個(gè)月后的葉數(shù)-接種時(shí)的葉數(shù);

  

  苗重=接種1個(gè)月后的苗重-接種時(shí)的苗重。

  

  1.3.3紅掌小苗瓶外生根。

  

  每個(gè)處理種植組培苗50株,設(shè)3次重復(fù),定植后放于70%遮陽網(wǎng)下進(jìn)行統(tǒng)一栽培管理。60d統(tǒng)計(jì)移栽成活率及根系生長(zhǎng)情況[6]。

  

  2、結(jié)果與分析

  

  2.16-BA、NAA、KT對(duì)叢生芽團(tuán)增殖的影響

  

  從表1可以看出,6-BA是影響叢生芽團(tuán)增殖的主要因素,各水平間差異顯著。隨著6-BA濃度的升高,叢生芽的重量增加呈直線上升趨勢(shì),表明6-BA在叢生芽增殖中具有重要作用,其濃度為1.5mg/L,叢生芽增重量達(dá)到14.80g。NAA與叢生芽的增殖也成正相關(guān)關(guān)系。KT與叢生芽的增殖成負(fù)相關(guān)關(guān)系,隨著KT含量的增加,叢生芽團(tuán)的重量增加反而減少,這證明了KT不利于叢生芽的增殖。綜上所述,有利于叢生芽增殖的培養(yǎng)基配方為MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+KT0.2mg/L+瓊脂7.6g/L+蔗糖25g/L。

  

  2.2NAA、6-BA、NH4NO3對(duì)壯苗的影響

  

  結(jié)果表明,6-BA是影響小苗增高重要的因素,NAA是次要因素。當(dāng)6-BA濃度是0.1mg/L時(shí),芽高度增加明顯,隨著6-BA濃度的增加,苗增高量減少,故6-BA濃度為0.1mg/L,苗增高量達(dá)到1.63cm。NAA是影響葉片增加的重要因素,當(dāng)NAA濃度為0.05mg/L時(shí),新增葉片數(shù)達(dá)15.71片,但新生葉片偏小。NH4NO3的濃度是影響小苗重量增加的主要因素,當(dāng)NH4NO3濃度為1650mg/L時(shí),小苗重量增加,達(dá)到7.71g;隨著NH4NO3用量的增加,小苗的增重減少。

  

  表1不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)叢生芽團(tuán)增殖的影響

  

  2.3瓶外生根

  

  紅掌組培快繁過程中,組培苗生根難,易產(chǎn)生愈傷組織,但是采用瓶外生根就可以很好地解決再產(chǎn)生愈傷組織的問題。育苗泥炭土種植的組培苗生根率優(yōu)于其他基質(zhì)。在種植基質(zhì)中加入IBA和NAA,NAA的處理效果均不太理想,而IBA處理的組培苗生根率均明顯高于NAA處理。綜上所述,采用育苗泥炭土+IBA0.6mg/L生根率和成活率高。

  

  3、結(jié)論

  

  試驗(yàn)結(jié)果表明,在0.5~1.5mg/L的范圍內(nèi),隨著6-BA濃度的增加,紅掌叢生芽增殖能力不斷增加,當(dāng)6-BA濃度增加至1.5mg/L時(shí)效果。在壯苗培養(yǎng)過程中,6-BA濃度與苗高增加量成負(fù)相關(guān),其濃度為0.1mg/L;NAA濃度是影響葉片增加的重要因素,其濃度為0.05mg/L時(shí)新增葉片數(shù)達(dá)到15.71片,但新生葉片偏;NH4NO3濃度是影響小苗重量增加的主要因素,但隨著NH4NO3用量的增加,小苗的增重減少,NH4NO3濃度為1650mg/L時(shí),苗重增值大。在瓶外生根試驗(yàn)中,使用育苗泥炭土+IBA0.6mg/L,組培苗成活率和生根率達(dá)到。


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